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百泰派克生物科技蛋白质谱测序客户案例期刊Molecular Therapy影响因子
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9150原文链接DOI:
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1016/j.ymthe.
2021.
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005研究对象肺动脉平滑肌细胞PASMCs研究目的探究lnc-Rps4l编码的肽是否参与缺氧诱导的PASMC增殖研究手段蛋白质组学测序等研究内容及结论缺氧引起的肺动脉平滑肌细胞PASMCs增殖是肺动脉高压PH的重要病理过程。
预防PASMCs增殖可有效降低PH死亡率。
长非编码RNAlncRNA参与增殖过程。
最近的证据表明由lncRNA编码的功能肽在细胞病理生理过程中起着重要作用。
先前的研究表明具有高编码能力的lnc-Rps4l在缺氧条件下介导PASMCs增殖。
在这项研究中假设lnc-Rps4l编码的肽参与缺氧诱导的PASMC增殖。
生物信息学、免疫荧光和免疫组织化学证实在低氧条件下pASMCs中存在lnc-Rps4l编码的40S核糖体蛋白S4 X亚型多肽RPS4X。
用MTT法、溴脱氧尿苷BrdU掺入法和免疫荧光法检测RPS4XL对缺氧性PASMCs增殖的抑制作用。
通过生物信息学、免疫共沉淀CoIP和质谱分析鉴定出RPS6与RPS4XL相互作用。
此外LNC-Rps4l编码的多肽RPS4XL通过与RPS6结合并抑制RPS6在p-RPS6Ser240Ser244位点的磷酸化来抑制RPS6过程。
这些结果系统地阐明了Rps4l编码的多肽RPS4XL在PASMCs增殖中的作用和调控网络。
这些发现为早期诊断提供了潜在的靶点并为治疗缺氧PH提供了主要化合物。
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png利用蛋白质谱测序技术表征Rps4l 编码的蛋白为了确认该肽段的aa序列将ORF-FLAG质粒转染到PASMCs中再使用抗flag抗体进行共免疫共沉淀最后切出与肽的预测分子量相对应的凝胶条带进行质谱分析结果检测到Rps4l编码的RPS4XL肽的几个特异性肽段。
生物信息学分析预测RPS
EHMT2和NANOG与rps4l编码的多肽RPS4XL相互作用然而CoIP和质谱分析表明只有RPS6而不是EHMT2或NANOG与RPS4XL相互作用。
参考文献Li Y, Zhang J, Sun H, et al. lnc-Rps4l-encoded peptide RPS4XL regulates RPS6 phosphorylation and inhibits the proliferation of PASMCs caused by hypoxia[J]. Molecular Therapy, 2021, 29(
: 1411-
1424.